细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段，其中间期又分为三个阶段：G1、S和G2，如果细胞在G1期受到调控阻留，则会转入G0期脱离细胞周期，在G0期的细胞仍然有进入细胞周期分裂的潜力。
G1期又称合成前期，物质代谢活跃，迅速合成RNA和蛋白质，主要为下阶段S期的DNA复制作好物质和能量的准备；S期即DNA合成期，合成DNA和组蛋白，DNA复制所需要的酶都在这一时期合成；G2期为DNA合成后期，是有丝分裂的准备期，DNA合成终止，大量合成RNA及蛋白质。
处在G2期的细胞DNA含量为G1期细胞的两倍，可以通过DNA含量来区分两种不同的细胞。此外，大量文献证明，处在G2期的细胞体积大于G1期的细胞。因此我们可以通过细胞体积和DNA含量两个指标来进行G1和G2期的细胞分选。实验中采用的DyeCycle Green是一种细胞渗透性DNA染料，DyeCycle Green荧光信号越强则表明细胞中DNA含量越高，FSC和BSC信号则与细胞大小有关。
WOLF细胞分选仪能够利用DyeCycle Green荧光强度表现细胞中DNA含量，由于DNA结合染料具有细胞毒性，会干扰基因组检测，因此我们仅使用这种染料作为散点图中G1门的框选步骤。如下图所示，首先在G1峰绘制一个门并突出显示为蓝色，查看FSC/BSC散点图上G1细胞出现的位置，然后在FSC/BSC散点图中蓝色突出显示细胞处绘制一个G1细胞门。
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使用WOLF单细胞柔性分选仪对这个门中的细胞进行富集分选，收集到的细胞再进行回测，得到下图左侧结果，可以看出富集后G1门中的细胞占比从45.4%提升到了91.8%。
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分选后的G1细胞继续进行24 h的培养，分选所得细胞的初始活率为90.1%，经过24 h的培养后，活率约为74%（下图左）。在24 h培养后对分选所得细胞又进行了一次分析，细胞仍保留了分裂功能，已经有部分细胞进入S期和G2期（下图右）。
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通过同样的圈门逻辑我们也可以进行G2细胞的分析和分选，使用DyeCycle Green荧光强度表现细胞中DNA的含量，DNA含量高的细胞则被认为是处于G2期的细胞，G2期细胞标记为红色，G1期细胞标记为蓝色（下图）。
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综上，WOLF被证实可以温和且准确的分选处于细胞周期不同阶段的活细胞，分选后的细胞能够有很高的纯度和活性。而且，经过 24 小时的培养后，细胞看起来很健康，并能够继续进入细胞周期的后续阶段，进一步证明了这些细胞在WOLF上分选后仍能保持分裂功能，这一工作流程同样适用于其他类型的细胞。
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