在制药工业，为了提高细胞培养的通量和效率，微型生物反应器一直在不断发展。小规模的细胞培养方式在CLD早期阶段和药物筛选过程的优化方面都有很高的价值。C.NEST作为一款微型生物反应器不仅能够实现混合培养，静态培养的表现也不输传统的培养箱。
图1 （A）C.NEST培养系统包含四个独立的腔室。（B）C.NEST培养环境控制。（C）C.NEST支持静态培养和混合培养。（D）C.NEST软件能同时控制4台仪器。
在制药工业，为了提高细胞培养的通量和效率，微型生物反应器一直在不断发展。小规模的细胞培养方式在CLD早期阶段和药物筛选过程的优化方面都有很高的价值。C.NEST作为一款微型生物反应器不仅能够实现混合培养，静态培养的表现也不输传统的培养箱。
在这里，我们用C.NEST培养了不同规格的细胞孔板中的细胞，并与传统培养箱中培养的细胞进行了比较。C.NEST静态培养时，每个腔室可以放入两块384孔板或两块96孔板或一块24孔板。
图2 在C.NEST中用不同规格的细胞板静态培养细胞。单细胞种在两块384孔板中，静态培养10天。2×105/mL CHO-S细胞种在两块96孔板和一块24孔板中静态培养。每个实验都在传统培养箱中设置对照实验。
下图显示了384孔板中的细胞生长状态，可以看到细胞生长速度与活率与传统培养箱相比并没有显著性差异。
图3 在 384 孔板中对 C.NEST 与标准培养箱的单细胞克隆进行比较。（A）通过一系列图像对每个单细胞进行监测。（B）在显微镜下观察克隆（比例尺 = 1 毫米）。将融合度分为 3 个等级，并评估每个等级中克隆的数量和百分比。（C）每组克隆分布的热图。（D 和 E）展示了在第 10 天每个汇合度等级中活细胞和细胞活力的代表性数据。（F）由于边缘效应，对外侧孔的细胞活力进行了确认。数据使用单因素方差分析（one-way ANOVA）进行分析，并以均值±标准误（mean ± SEM）表示。P 值的显著性表示为：P≥0.05（无显著差异，ns），P<0.05（*），P<0.01（**），P<0.001（***），P<0.0001（****）
24孔板和96孔板的实验结果如下图所示，细胞各方面表现与传统培养箱相比也无显著性差异。
图4 对比C.NEST和培养箱培养的96孔板和24孔板中的细胞状态。(A-C) 在培养第3天时，对96孔板培养的总细胞密度、活细胞密度和活细胞率进行分析。数据采用单因素方差分析进行分析。(D-F) 在培养第3天时，对24孔板培养的总细胞密度、活细胞密度和活细胞率进测量。数据采用配对双尾t检验进行分析。所有数据均以平均值±标准误表示，P值的显著性以P≥0.05(ns)、P<0.05(*)、P<0.01(**)、P<0.001(***)、P<0.0001(****)表示。
哺乳动物细胞系，如CHO-S，通常用于生产生物制药行业的治疗性蛋白质。一般来说，治疗性蛋白质是在高达2000 L的生物反应器中的细胞分泌，在大规模培养之前，需要经过一个复杂的过程来选择和确认高产细胞系。摇瓶通常应用于工艺开发，但往往占用空间大。微孔板可以解决这些限制，在平行实验中进行工艺开发。
在这篇文章中，C.NEST细胞培养系统显示了不同细胞培养的能力 (图3和图4)。因此，在CLD过程中应用C.NEST是一个很好的选择。我们已经证实，单细胞可以在C.NEST培养的384孔板中正常生长（图3），96孔和24孔培养效果良好 (图4)。表明克隆也可以扩大到96孔和24孔板，在同一个C.NEST室中进行静态或混合培养。此外，多尺度微孔板可应用于多种领域，如384孔板可用于病毒细胞的筛选融合实验，96孔板用于药物发现中的细胞球形成，24孔板用于工艺开发中的培养基筛选。小型化的检测方法可以减少大规模试验的耗材成本，被认为是在医学、生物技术等领域应用的一个趋势。
同腾睿杰（上海）生物科技有限公司作为 Cytena C.NEST 新一代微型生物反应器中国代理商，为您提供优质的售前售后服务。
联系电话：021-50826962
联系邮箱：sales@ttbiotech.com
